Live or Dead 固定化死細胞標記試劑盒是美國AAT Bioquest生產的染色細胞的試劑盒，我們的Live或Dead 可固定死細胞染色試劑盒是用于標記細胞的一組工具，用于對細胞功能進行熒光顯微鏡檢查。 細胞的有效標記為研究細胞事件提供了一種有力的方法。 該特定試劑盒設計用于以藍色熒光均勻標記固定的哺乳動物細胞，以進行長期的顯微鏡檢查。 該試劑盒使用了專有的藍色熒光染料，該染料在與細胞成分結合后會發出更多的熒光。 試劑盒中使用的熒光染料具有很好的光穩定性，因此可以重復檢查圖像。 該試劑盒為所有基本組件提供了優化的細胞標記方案。 它是保存特定細胞熒光圖像的工具，也可用于熒光顯微鏡。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優質的Live或Dead 可固定死細胞染色試劑盒。 

樣品實驗方案

簡要概述

1.用HHBS制備樣品（0.5 mL /分析）
2.替換為HHBS
3.將Stain It 添加到細胞懸浮液中
4.在室溫或37°C下染色細胞20-60分鐘
5.洗凈細胞
6.固定細胞（可選）
7.使用適當的激發/發射濾光片，用流式細胞儀和/或熒光顯微鏡檢查樣品

 

操作步驟

表1.用于流式細胞術分析的熒光光譜特性和激發光

貨號	描述	Ex(nm)	Em(nm)	激發光源（nm）
22500	藍色熒光，405nm激發	410	450	405
22501	綠色熒光，405nm激發	408	512	405
22502	橙色熒光，405nm激發	398	550	405
22599	紅色熒光優化用于流式細胞術	523	617	488
22600	藍色熒光	353	442	335
22601	綠色熒光	498	521	488
22602	橙色熒光	547	573	561或488
22603	紅色熒光	583	603	561
22604	深紅色熒光	649	660	633
22605	近紅外熒光	749	775	633

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的無疊氮化鈉和無血清/蛋白質的緩沖液制備細胞。

2.用HHBS或您選擇的無疊氮化物和無血清/蛋白質的緩沖液洗滌細胞一次。

3.以5-10×106 / mL的濃度在HHBS或您選擇的無疊氮化物和無血清/蛋白質的緩沖液中重懸細胞。

4.將1 μL 500X Stain It 儲備液添加到0.5 mL細胞/測定中，并充分混合。

5.在室溫或37°C，5％CO2的培養箱中避光保存20-60分鐘。 注意：應根據不同細胞系實驗確定染色濃度和孵育時間。

6.洗滌細胞兩次，然后用HHBS或您選擇的緩沖液重懸細胞。

7.根據需要固定細胞（可選）。

8.使用適當的激發/發射濾光片，使用流式細胞儀和/或熒光顯微鏡分析細胞（參見表1）。

 

參考文獻

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Versatile fabrication of nanoscale sol--gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
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Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$\kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
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