TRIS-EDTA Antigen Retrieval Solution (50×) pH8.0

TRIS-EDTA抗原修復液（50×）pH8.0

產品簡介：

EDTA抗原修復液是一種常用的抗原修復液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。

細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，組織中的許多氨基酸殘基形成醛鍵、羧甲鍵而封閉了部分抗原決定簇，同時蛋白之間發生交聯也使抗原決定簇隱蔽。導致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現一些假陽性染色結果。因此，對于石蠟切片，要求在進行IHC染色前，先進行抗原修復，即將固定時分子之間所形成的交聯破壞，恢復抗原的原有空間形態。EDTA緩沖液是除檸檬酸緩沖液外另一種常用的IHC抗原修復液。有部分抗原用EDTA緩沖液修復效果好于檸檬酸緩沖液。特別是對于某些核抗原效果會更明顯。

本抗原修復液采用了廣泛使用的EDTA，可以有效去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。通常石蠟切片都需進行抗原修復處理，而冰凍切片可以不進行抗原修復處理。抗原修復會大大改善石蠟切片的免疫染色效果，但對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯著改善。特別是當冰凍切片免疫染色效果欠佳時，可以考慮嘗試進行抗原修復。從原理上來看，無論冰凍切片還是細胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品，進行抗原修復都會有效去除蛋白之間的交聯，充分暴露抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

本產品可以配制成5000ml抗原修復液（1×）。按照每個玻片需要10ml抗原修復液（1×）計算，本產品可用于500個樣本的抗原修復。

使用方法（參考）：

一．石蠟切片

      A脫蠟：

（1）浸泡在二甲苯中3次，每次3～5min，每次更換新的二甲苯。

（2）無水乙醇脫水2次，每次3～5min。

（3）95%乙醇3-5min。

（4）90%乙醇3-5min。

（5）70%乙醇3-5min。

（6）餾水沖洗兩次，每次3～5min。

B抗原修復：

（1）用去離子水或雙蒸水稀釋TRIS-EDTA抗原修復液（50×）至1×，例如1ml TRIS-EDTA抗原修復液(50×)加入49ml去離子水，混合均勻，即可得1× TRIS-EDTA抗原修復液。

（2）抗原修復液(1×)使用前需預熱至95℃。

（3）將切片浸泡在抗原修復液（1×）中，95-100oC加熱約20分鐘。

C冷卻至室溫后，免疫染色洗滌液洗滌1～2次，每次3～5分鐘。

D進行封閉等后續的免疫染色步驟。

二．冰凍切片

（1）用去離子水或雙蒸水稀釋TRIS-EDTA抗原修復液（50×）至1×。

（2）免疫染色洗滌液洗滌切片3～5分鐘。

（3）將切片浸泡在抗原修復液（1×）中，95℃或沸水加熱約20分鐘。

（4）抗原修復液（1×）使用前預熱至95-100℃。

（5）冷卻至室溫后，免疫染色洗滌液洗滌1～2次，每次3～5分鐘。

（6）進行封閉等后續的免疫染色步驟。

 注意事項：

1、  浸泡在抗原修復液（1×）中，*佳的加熱時間需根據不同的樣品和目的蛋白自行實驗。

2、  如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發。

3、  本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，

4、  為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

保存條件：

4℃保存，有效期一年。